鈣熒光探針 Fluo 3-AM
貨號(hào)：F8840
規(guī)格：100ug/1mg
CAS：121714-22-5
別名 : 鈣熒光探針 鈣離子探針 
分子式 : C51H50Cl2N2O23 
分子量 : 1129.85 
儲(chǔ)存條件 : -20°C干燥避光保存，有效期12個(gè)月 
純度 : ≥90%(HPLC) 
外觀（性狀） :  紅色粉末 
單位 : 瓶

Fluo-3AM的理化性質(zhì)

    吸收波長(zhǎng)/發(fā)射波長(zhǎng)：506nm /526nm(低/高鈣)

    建議使用DMSO作為溶媒。在溶解前，F(xiàn)LUO-3AM和DMSO均須放置室溫。溶解過程可能會(huì)比較慢。用無水的DMSO溶解的FLUO-3AM長(zhǎng)期保存，應(yīng)嚴(yán)格密封，并保存于-20度。使用前，將保存液放置室溫后再打開。可避免AM探針在長(zhǎng)期的保存過程中水解。

Fluo-3AM的工作原理

    FLUO-3廣泛用于長(zhǎng)波長(zhǎng)的熒光鈣指示劑。其在506NM處被吸收，可以被氬離子激光的488nm激發(fā)光激發(fā)，便于檢測(cè)。FLUO-3在沒有同鈣結(jié)合的情況下，無熒光產(chǎn)生。但是，在與鈣結(jié)合后，熒光（526nm）增強(qiáng)少40倍。Fluo-3 AM是一種可以穿透細(xì)胞膜的熒光染料。Fluo-3 AM的熒光非常弱，其熒光不會(huì)隨鈣離子濃度升高而增強(qiáng)。Fluo-3 AM進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-3，從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)。Fluo-3可以和鈣離子結(jié)合，結(jié)合鈣離子后可以產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光，大激發(fā)波長(zhǎng)為506nm，大發(fā)射波長(zhǎng)為526nm。實(shí)際檢測(cè)時(shí)推薦使用的激發(fā)波長(zhǎng)為488nm左右，發(fā)射波長(zhǎng)為525-530nm。

Fluo-3AM的應(yīng)用

1、過程概述

     用于細(xì)胞內(nèi)鈣離子檢測(cè)時(shí)，F(xiàn)luo-3 AM的常用濃度為5μM。通常用含有5μM的Fluo-3 AM的適當(dāng)溶液和細(xì)胞一起在37℃孵育30-60分鐘進(jìn)行熒光探針裝載，隨后適當(dāng)洗滌，洗滌后可以考慮適當(dāng)再孵育20-30分鐘以確保Fluo-3 AM在細(xì)胞內(nèi)*轉(zhuǎn)變成Fluo-3。然后在流式細(xì)胞儀上進(jìn)行檢測(cè)。

2、Fluo-3AM使用液的配置

     100ug的Fluo-3AM，分子量是1219.9。按實(shí)際需要的摩爾濃度折算，無水DMSO溶解。一般配置成1~5mM的DMSO儲(chǔ)存液。如出現(xiàn)難溶現(xiàn)象，可以用20%的F127的DMSO溶液助溶。

相關(guān)文獻(xiàn)：

《Epigenetically upregulated oncoprotein PLCE1 drives esophageal carcinoma angiogenesis and proliferation via activating the PI-PLCε-NF-κB signaling pathway and VEGF-C/ Bcl-2 expression》 作者:Yunzhao Chen, Dandan Wang, Hao Peng, Xi Chen, Xueping Han, Jie Yu, Wenjie Wang, Lirong Liang, Zheng Liu, Yi Zheng, Jianming Hu, Lan Yang, Jun Li, Hong Zhou, Xiaobin Cui and Feng Li 期刊:Molecular Cancer 影響因子:10.679 PMID:30609930、
 

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