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神奇濾布的作用說明

更新時間:2018-06-04點擊次數:1280
  基因工程轉化真菌和一些土壤細菌時,往往需要先消化掉厚厚的細胞壁,制備分離原生質體以便進行轉化,即使是大家很熟悉的酵母轉化,當簡便的醋酸鋰方法不起作用時,原始也是有效方法還是原生質體轉化。當經過消化處理的菌體混合液經過Miracloth過濾后,就可以去掉未被消化*的菌體和雜質,分離得到的“裸露的”原生質體就可以準備進行轉化或者電轉了。如果沒有這一步的分離,未*消化的菌體由于生長迅速,會嚴重干擾結果。
  植物基因組純化相對比較麻煩一點,市面上有不少試劑盒可供選擇,多數純化基因組DNA的試劑盒采用快速離心方法,其純化產物大小僅為50kb左右。你可能沒有想到,一種改良的神奇濾布快速純化方法是另一種經濟有效的選擇:通過液氮研磨得到的組織經過裂解液處理,溫浴、醋酸鉀冰浴復性,用 神奇濾布過濾,得到的濾液可以直接用異丙醇沉淀。這個方法改良于玉米基因組純化,特別適合各種植物組織DNA的純化。大的優點是快速經濟實用,不需要昂貴的試劑盒或者試劑,整個方法就像用試劑盒一樣簡單。
  如果需要植物組織的高分子量基因組就不宜采用試劑盒。神奇濾布是另外一個好選擇--植物組織勻漿后直接用Miracloth過濾就可以得到含有細胞核的溶液,離心沉淀細胞核,后繼的高分子量基因組抽提就簡單易行了。此外,這個方法還可以用于制備研究轉錄因子所用的細胞核抽提物(Nucleic Extract),甚分離純化線粒體DNA、細胞膜等等。

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